Съдържание
- ELISA тест: какъв е принципът?
ELISA тест: какъв е принципът?
Определение: какво представлява тестът ELISA?
Техниката на свързан ензимен имуноабсорбционен анализ-на английски Enzyme-Linked Immuno Assay-или ELISA тест е имунологичен тест, който позволява откриването или анализа на молекули в биологична проба. Той е разработен и разработен от двама шведски учени, Петер Перлман и Ева Енгвал от Стокхолмския университет през 1971 г.
Молекулите, изследвани по метода ELISA, обикновено са протеини. А пробите включват течни биологични материали -плазма, серум, урина, изпотяване -, среда за клетъчна култура или рекомбинантен протеин -протеин, произведен от клетка, чийто генетичен материал е променен чрез генетична рекомбинация -пречистен в разтвор.
ELISA тестът се използва главно в имунологията за откриване и / или измерване на наличието на протеини, антитела или антигени в проба. Този серологичен тест открива по -специално антителата, произведени от организма в отговор на вирусно замърсяване.
Принцип на ELISA теста за инфекциозни заболявания
Използването на антитела за диагностициране на инфекциозни заболявания представлява специфичен и бърз метод. ELISA техниката е имуно-ензимна техника, която позволява да се визуализират, от биологична проба, реакциите между антиген-тяло, считано за чуждо от живия организъм-и антитяло, използващо цветна реакция, продуцирана от ензимен маркер- обикновено алкална фосфатаза и пероксидаза - преди това прикрепени към антитялото. Цветната реакция потвърждава идентифицирането на изолираната бактерия или наличието на желания вирус, а интензитетът на цвета дава индикация за количеството антигени или антитела в дадената проба.
Различните видове ELISA тестове
Има четири основни типа ELISA тест:
- Директен ELISA, дава възможност за откриване или измерване на антитела. Той използва само първично антитяло;
- Непряк ELISA, най -широко използваният, също дава възможност за откриване или анализ на антитела. Той използва вторично антитяло, което му дава по -добра чувствителност от директния ELISA;
- ELISA в състезание, позволява дозирането на антигени. Произведено чрез конкуренция за облигации, не използва ензим;
- ELISA «в сандвич», позволява дозирането на антигени. Тази техника често се използва в научните изследвания.
Използване на ELISA тест
Тестът ELISA се използва за:
- Намерете и измерете антитела в серологията за диагностика на инфекциозни заболявания: вирусология, паразитология, бактериология и др .;
- Дозирайте протеини при ниски концентрации: специфични дози на определени плазмени протеини (имуноглобулин Е (IgE), феритин, протеинови хормони и др.), Туморни маркери и др .;
- Дозирайте малки молекули: стероидни хормони, хормони на щитовидната жлеза, лекарства ...
Най-честите случаи: Covid-19, денга, HIV, лаймска болест, алергии, бременност
ELISA тестът се използва по -специално за диагностициране на много инфекциозни заболявания:
Болести, предавани по полов път (ППБ)
Включително хепатит, сифилис, хламидия и ХИВ. Препоръчан от здравните власти, това е основният скринингов тест за СПИН: той показва наличието на анти-HIV антитела и р24 антигена шест седмици след заразяването.
Регионални или ендемични заболявания
Жълта треска, вирусна болест на Марбург (MVM), Ладенге, Лаймска болест, Чикунгуня, треска на Рифт Вали, Ебола, треска Ласа и др.
Covid-19
За да се проведе повече от 2 до 3 седмици след появата на симптомите, тестът ELISA дава възможност за по-малко от час да се идентифицира наличието на антитела срещу SARS-CoV-2.
Вирусни патогени, които причиняват пренатални инфекции
Токсоплазмоза, рубеола, цитомегаловирус, херпес симплекс например.
Други случаи
Но той също е намерил приложения за откриване:
- Бременност;
- Автоимунни заболявания;
- Хранителни алергени: количественото определяне на общите имуноглобулини Е (IgE) помага при оценката и лечението на алергии;
- Хормонални нарушения;
- Туморни маркери;
- Растителни вируси;
- И много други
Надеждност на теста Covid-19
Като част от откриването на антитела срещу SARS-CoV-2, пилотно проучване, проведено през август 2020 г. от Института Пастьор, CNRS, Inserm и Университета в Париж, потвърждава надеждността на теста ELISA: и двата теста ELISA тестват използването целият N протеин на SARS-CoV-2 (ELISA N) или извънклетъчният домен на вируса (S) като целеви антигени. Тази техника би направила възможно идентифицирането на антитела в повече от 90% от случаите, с много ниска фалшиво-положителна честота от 1%.
Цена и възстановяване на теста ELISA
Провеждани в лаборатории за анализ по лекарско предписание, тестовете на Elisa струват около 10 евро и се възстановяват на 100% от здравната застраховка.
Извършвани в безплатни информационни, скринингови и диагностични центрове (CeGIDD), те могат да бъдат безплатни за HIV и SARS-CoV-2.